適應無血清培養(yang) 基

許多連續細胞係,如HeLa,CHO-K1或小鼠骨髓廇可能可以適應於(yu) 缺乏血清的生長環境.適應過程常常是一個(ge) 很長的選擇周期,此間隻有細胞群體(ti) 中的少數被選擇出來,因此在此選擇過程中確保細胞係的性質不喪(sang) 失是很重要的.如果是骨髓瘤細胞,其目的是用於(yu) 製備雜交廇,而如果是CHO細胞則用於(yu) 做轉染實驗,因此用無血清培養(yang) 基的選擇培養(yang) 必須在融合和轉染之前進行,使選擇過程中丟(diu) 失特性的危險性降到低.

適應無血清培養(yang) 基通常要經過幾次連續的傳(chuan) 代培養(yang) ,使血清濃度逐漸降低.一旦細胞在某一血清濃度條件下形成穩定的增殖狀態,就可用更低濃度的血清將細胞傳(chuan) 代培養(yang) ,直至穩定的生長增殖再次形成,而後再次稀釋血清.如果是懸浮培養(yang) ,要計算活細胞的數量 ,根據活細胞的數量稀釋細胞懸液,此時需要保持的低細胞濃度要比正常傳(chuan) 代培養(yang) 所需的細胞濃度高一些.對於(yu) 單層細胞培養(yang) ,可在傳(chuan) 代培養(yang) 的前幾天先降低培養(yang) 基中的血清濃度,而後再用新的低濃度培養(yang) 基進行傳(chuan) 代培養(yang) .在適應過程中,可能有必要在培養(yang) 基中添加一些已知的因子來代替血清.