無血清的培養(yang) 基的製備

現在應用的無血清培養(yang) 基種類很多,一些廠家可提供針對特殊類型細胞的無血清培養(yang) 基.製備無血清培養(yang) 基的操作方法與(yu) 製備常規培養(yang) 基的程序大致相同.配製時要用超純的試劑和水,小心配製Ca2+,Fe2+或Fe3+的溶液,防止產(chan) 生沉澱.在堿性pH的條件和有磷酸鹽存在的條件下金屬鹽溶液會(hui) 產(chan) 生沉澱,在培養(yang) 基或鹽溶液經過高壓滅菌後尤為(wei) 如此,所以儲(chu) 存液中的陽離子必須保存在低pH條件下,並且要保證無磷酸鹽的存在.溶液要經過高壓滅菌或過濾消毒.通常推薦的方法是臨(lin) 用培養(yang) 基之前再加陽離子.或者將各種組分通常要配製成一係列的儲(chu) 存液:1000×的礦物質和維生素,50×的酪氨酸,色氨酸,苯丙氨酸溶解於(yu) 0.1mol/L HC1中,100×的必需氨基酸溶解於(yu) 水中,10×的鹽溶解於(yu) 水中,還有其他的特殊輔助因子,脂類等配製成1000×溶液.這些成分要按照正確的比例配製並稀釋到終的濃度,然後檢測pH和滲透壓.

建議在使用培養(yang) 基之前再分別加生長因子,激素,和細胞黏附因子,並且要調整到適合於(yu) 特定的實驗條件.