無血清培養(yang) 基的研發

研製針對特殊細胞係或原代培養(yang) 的無血清培養(yang) 基主要有兩(liang) 種方法.種方法是找到一個(ge) 相關(guan) 細胞類型的培養(yang) 基已知配方,加入或不加10%~20%的透析血清,在減少血清的同時,逐一或成組的改變培養(yang) 基成分直到培養(yang) 基達到你所特殊需要的理想條件.這種方法初由Ham及其同事[Ham,1984]采用,通常能提供理想培養(yang) 條件.如果發現一組成分對血清的減少起到補充的作用,那就通過單種成分的逐步逐一刪除將這一活性成分從(cong) 中篩選出來然後尋找其理想濃度[Ham,1984].當然,這是一項耗時而繁雜的工作,包括繪製細胞生長的生長曲線,每個(ge) 階段做克隆生長分析,找到一種適合新細胞類型的新培養(yang) 基至少要三年時間.

由於(yu) 種方法耗費時間長,使人們(men) 想到了第二種方法:對現在培養(yang) 基,如RP-MI1640或DMEM與(yu) Ham’s F12的聯合培養(yang) 基加以補充,而且將加入成分的種類限製在一個(ge) 較小的範圍內(nei) ,僅(jin) 包括硒,轉鐵蛋白,白蛋白,胰島素,氫化可di鬆,雌激素,三磺甲狀腺氨酸,乙醇胺,磷酸乙醇胺,生長因子(EGF,FGF,PDGF,內(nei) 皮生長添加物等),前列腺素和其他有特殊功能的物質.通常對多數細胞而言,硒,轉鐵蛋白,胰島素都很重要,但對其他成分的需求則差別較大.