人P16免疫組化試劑盒說明書(shu)
該試劑盒以HRP標記的鏈黴親(qin) 和素複合物(HRP Streptavidin Conjugate,HRP-SA)為(wei) 基礎,可用於(yu) 檢測細胞、組織內(nei) 的特異性P16抗原。該試劑盒具有靈敏度高、特異性強、定性定位準確、背景清晰。在所用的P16一抗與(yu) 相應靶抗原結合後,用生物化二抗與(yu) 一抗特異性結合,後加入HRP-SA,形成抗原—特異一抗—生物素化二抗—HRP-SA複合物,顯微鏡下觀察成像。
注:本產(chan) 品僅(jin) 供實驗室科學研究。本步驟是根據我們(men) 長期實驗得出的有效步驟,請客戶根據具體(ti) 科研實驗情況進行調整和優(you) 化,並歡迎客戶和我們(men) 探討。
試劑盒所含試劑:
試劑A 通透液:0.1% Triton-X 100 10 mL(選用)
試劑B 封閉緩衝(chong) 液(封閉用) 20 mL
試劑C (*分裝)已稀釋的即用型P16一抗(2.5ml)
試劑D (*分裝)生物素化羊抗兔IgG 1支
(濃度1.5 mg/mL,稀釋比為(wei) 1:300~1:500)50 μL+抗體(ti) 稀釋液20ml
試劑E HRP-SA複合物1支(濃度1 μM,稀釋比1:50~1:200)100 μL
試劑F DAB顯色液 5ml
用戶自備試劑:
1. 10mM TBS(pH7.2~7.4)
三羥基氨基甲烷1.21g
氯化鈉7.6g
加蒸餾水800mL,濃鹽酸調pH值至7.2~7.4,後定容至1000mL
TBS-T:TBS+Tween 20(0.05%體(ti) 積比)
2.抗原修複液(依檢測抗原不同而選擇不同的修複液)
10mM pH6.0 檸檬酸緩衝(chong) 液
檸檬酸0.38g
檸檬酸三鈉2.45g
加蒸餾水900mL,濃鹽酸調pH值至6.0,後定容至1000mL
或:0.5M EDTA修複液(pH8.0)
EDTA·2H2O 186.1g
檸檬酸三鈉2.45g
加蒸餾水700mL,用10mM NaOH調pH值至8.0,後定容至1000Ml
3. 緩衝(chong) 甘油封固劑10 mL
4. Tween 20 5 mL