聚合酶鏈式反應酶聯免疫吸附分析法(PCR-ELISA)

   聚合鏈式反應(Polymerase Chain Reaction,簡稱PCR),是用於(yu) 放大特定的DNA片段,在生物體(ti) 外複製DNA的分子生物學技術.ELISA是免疫學測定中敏感和特異的檢測方法的代表.PCR-ELISA綜合上述兩(liang) 方法,成為(wei) 繼PCR之後靈敏性更高,特異性更強,更省時易行的新檢測方法,並且解決(jue) 了PCR產(chan) 物宣的問題,使得PCR在臨(lin) 床醫學上得以應用.

   PCR產(chan) 物的生成量是以指數增加的.PCR能將pg=10-⒓g量級的DNA起始待測模板擴增到微克(ug=10-⒍g)水平,能從(cong) 100萬(wan) 個(ge) 細胞中檢測出一個(ge) 靶細胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達3個(ge) 空斑形成單位(Plaque form-ing unit,簡稱PFU);在細菌的檢測中,即使低至1個(ge) 細菌的靶DNA也能被檢出.PCR是分子生物學中檢測DNA普遍和靈敏的技術.PCR反應擴增出相關(guan) DNA高拷貝數,以前用熒光素(溴化乙錠,簡稱EB)染色凝膠電泳進行檢測,但無法定量.曾有人利用熒光素染色凝膠電泳的掃描照片進行光密度分析,希望通過光密度的變化實現PCR的定量,但由於(yu) 熒光素染色凝膠電泳本身的檢測結果不具有特異性,因此光密度分析無法獲得定量的結果,這使得長期以為(wei) ,PCR隻能獲得相對定量的結果,無法應用在臨(lin) 床醫學上.科技的發展是相互影響的,酶聯免疫吸附分析法(ELISA)的出現啟發了人們(men) ,為(wei) PCR的定量開辟了一條新的思路.在PCR擴增以後,利用ELISA的原理和方法,使用酶標抗體(ti) ,通過免疫吸附,酶促反應產(chan) 物的分析來實現定量,這樣的新方法被稱為(wei) PCR-ELISA.