貨號：YX-C-A604                                                 規格：50管/48樣

苯丙氨酸解氨酶試劑盒說明書(shu)

紫外分光光度法

產(chan) 品簡介：

PAL（EC4. 3 1 5）廣泛存在於(yu) 各種植物和少數微生物中，是植物體(ti) 內(nei) 苯丙烷類代謝的關(guan) 鍵酶，與(yu) 一些重要的次生物質如木質素、異黃酮類植保素、黃酮類色素等合成密切相關(guan) ，在植物正常生長發育和抵禦病菌侵害過程中起重要作用。PAL催化L-苯丙氨酸裂解為(wei) 反式肉桂酸和氨，反式肉桂酸在290nm處有大吸收值，通過測定吸光值升高速率計算PAL活性。

試驗中所需的儀(yi) 器和試劑：

紫外分光光度計、水浴鍋、台式離心機、可調式移液器、1ml比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

產(chan) 品內(nei) 容：

提取液：液體(ti) 60mL×1瓶，4℃保存；

試劑一：液體(ti) 40mL×1瓶，4℃保存；

試劑二：粉劑×3瓶，4℃保存，臨(lin) 用前每瓶加入4mL雙蒸水充分溶解待用；現配現用。

試劑三：液體(ti) 2.5mL×1瓶，4℃保存；

操作步驟：

一、粗酶液提取：   

稱取約0.1g組織，加入1mL提取液進行冰浴勻漿。10000g，4℃離心10min，取上清，置冰上待測。

二、測定操作表：

混勻，靜置10min後，用對照管調零，290nm處記錄測定管吸光值A  (A=A測定管-A對照管)。

PAL活性計算：

（1）按樣本蛋白濃度計算：

單位的定義(yi) ：每mg組織蛋白在每ml反應體(ti) 係中每分鍾使290nm下吸光值變化0.1定義(yi) 為(wei) 一個(ge) 酶活力單位。

PAL（U/mg prot）=A×反應總體(ti) 積（1040μL）÷樣本體(ti) 積（20μL）÷反應時間(30min)÷0.1 ÷蛋白濃度（mg/mL）=17.3×A ÷蛋白濃度（mg/mL）

（2）按樣本鮮重計算：

單位的定義(yi) ：每g組織在每ml反應體(ti) 係中每分鍾使290nm下吸光值變化0.1定義(yi) 為(wei) 一個(ge) 酶活力單位。

PAL（U/g 鮮重）=A×反應總體(ti) 積（1040μL）÷﹝樣本鮮重（g）×樣本體(ti) 積（20μL）÷V樣總（1mL）﹞÷反應時間(30min)÷0.1 =17.3×A ÷樣本鮮重（g）

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