包涵體(ti) 蛋白溶解液說明書(shu)
InclusionbodyDenatureReagent
Cat.No. K0007
保存:2 - 8 ℃
組分說明
Cat.No. K0007A
Volume 100ml
產(chan) 品簡介
包涵體(ti) 是重組蛋白因為(wei) 過度表達、蛋白無足夠時間進行肽鏈折疊,部分折疊中間態之間的特異性錯誤聚合形成的一種不溶性結構。這些基因表達產(chan) 物的氨基酸序列雖然正確,而其立體(ti) 結構是錯誤的,因此一般沒有生物活性。包涵體(ti) 一般含有50%以上的重組蛋白,其餘(yu) 為(wei) 外源蛋白、核糖體(ti) 元件、RNA 聚合酶、內(nei) 毒素、外膜蛋白 ompC、ompF 和ompA 等、核酸(環狀或缺口的質粒DNA),以及脂體(ti) 、脂多糖等,無定形,呈非水溶性,隻溶於(yu) 變性劑如尿素、鹽酸胍等。使用本產(chan) 品提取包涵體(ti) 蛋白,可增加包涵體(ti) 蛋白的溶解性,提高包涵體(ti) 蛋白的提取效率,變性劑可通過透析去除。
注意事項
1. 本試劑含有變性劑,操作時請穿著實驗服並佩戴一次性手套。
2. 在低於(yu) 4℃的保存溫度下易出現絮狀沉澱,使用時恢複至室溫,絮狀沉澱溶解後即可進行後續步驟。
操作步驟
1. 用細菌裂解液或其他方法裂解菌液後提純包涵體(ti) 。
2. 1g 包涵體(ti) 濕重中加入8ml 包涵體(ti) 蛋白溶解液(粗略估算包涵體(ti) 濕重)。
3. 加入溶解液後混勻,振搖孵育30 分鍾。
4. 離心去除細胞碎片。
5. 收集上清液,進行後續步驟測試。
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