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蛋白印跡膜再生液實際操作技巧和注意事項
點擊次數:7462 更新時間:2021-03-17

蛋白印跡膜再生液說明書(shu)

Stripping Buffer

目錄號:K0056

保存條件:室溫(15-25℃)保存。

 規格說明

 Cat. No.  K0056      K0056A

Volume     100 ml      500 ml   

 產(chan) 品簡介

  本產(chan) 品采用溫和洗滌配方,可在不影響目的蛋白的情況下,去除結合在印跡膜上

的一抗和二抗,使同一張膜可進行多次抗體(ti) 檢測,無需反複電泳和轉膜,節省樣品和

時間,適用於(yu) 使用NCPVDF膜進行Western Blot檢測時條件的優(you) 化或同一樣品不同蛋

白的檢測。

 本產(chan) 品僅(jin) 供科研使用,請勿用於(yu) 臨(lin) 床診斷及其他用途    

 注意事項

 1.建議先檢測表達量較低的目的蛋白,用再生液處理後檢測表達量高的蛋白,如內(nei) 參蛋白等。

2.請佩戴手套操作。

 操作步驟

 1.將曝光後的膜取出,加入適量的再生液(再生液充分覆蓋膜表麵,8.5 cm×5.5 cm膜加入15  ml左右再生液),室溫振搖孵育15分鍾左右(孵育時間應根據不同的目的蛋白來調整:比如內(nei) 參抗體(ti) 等表達量較高的蛋白,使用再生液時可以延長孵育時間至1小時或者在37℃孵育30分鍾)。

2.棄去再生液,用15 ml緩衝(chong) 液(PBSTTBST)洗膜3次,每次5 分鍾,室溫振搖。

3.為(wei) 了檢測酶標二抗洗脫是否*,此時可以用顯色方法來確定二抗是否洗脫掉。

4.待檢測完畢,確認膜上無殘留的酶活性,再生後的膜通過加入15 ml的封閉液進行封閉,室溫30分鍾或者4℃封閉過夜。

5.重新加入待測一抗,進行下一輪的WB實驗。

 

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