細胞分離是指將組織分散製成細胞懸液後從中獲取目的細胞的過程。細胞純化更進一步強調從原代培養前成分混雜的異質性細胞懸液中或者從培養物中獲得單一類型細胞的過程。

　　分離和純化細胞的過程不僅僅在原代培養之前進行的，有時分離和純化細胞的過程還貫穿於原代培養和繼代培養的過程中，甚至是主要依賴培養過程實現分離和純化細胞的目的。

　　細胞分離液是一種經過聚乙烯吡咯烷酮處理過的矽膠顆粒，經過高速離心後可形成連續密度梯度，由於Percoll擴散常數低，所形成的梯度十分穩定。分離液采用預先形成的密度梯度時可在低離心力(200～1000g)於數分至數十分鍾內達到滿意的細胞分離結果。此外，分離液不穿透生物膜，對細胞無毒害，因此廣泛用於分離細胞、亞細胞成分、細菌及病毒，還可將受損細胞及其碎片與完好的活細胞分離。常用於分離和傳話植物原生質體、核、葉綠體、和線粒體。

　　細胞分離液的配置與使用

　　1、不同濃度(密度)分離液的製備:先用9份分離液與1份8.5％NaCl或1.5MPBS混合達到生理性滲透壓，然後用生理溶液(0.85％NaCl或0.15MPBS)稀釋到所需濃度。

　　2、不連續密度梯度層的製備:先將試管壁用牛血清濕潤，除去多餘血清，這種預處理可使逐層疊加的液平穩沿管壁流下，使形成滿意的界麵。在製備過程中一般用長針頭注射器從高密度向低密度逐層放置，有時相鄰兩層比重相差不大時，可將液放入注射器中，小針頭斜麵緊貼管壁，任其自然慢慢流下。

　　3、裝樣：樣品體積和細胞濃度根據不同細胞而異，一般加樣體積不宜過大，細胞濃度也不可過高，否則會影響細胞的分離和回收。

　　4、離心：一般采用離心力為400g，時間20～25min。由於多層之間密度差別不大，因此離心機加速、降速時要慢，要平穩。

　　5、取樣：當所要分離的細胞絕大部分在兩層的界麵時，可逐層去除液後收集界麵部位的細胞;有時大部分細胞位於層中,則需要逐層收集。收獲含有液的細胞經2次洗滌後可供培養或檢測用。