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我們來說說細胞分離液的配置與使用
點擊次數:1465 更新時間:2022-04-24
  細胞分離液屬於生化試劑,利用細胞分離液對機體細胞標本進行前處理,以獲取所需要的細胞標本。
  細胞分離液是一種經過聚乙烯吡咯烷酮處理過的矽膠顆粒,經過高速離心後可形成連續密度梯度,由於Percoll擴散常數低,所形成的梯度十分穩定。
  細胞分離液的配置與使用:
  1、不同濃度(密度)分離液的製備: 先用9份分離液與1份8.5% NaCl或1.5MPBS混合達到生理性滲透壓,然後用生理溶液(0.85% NaCl或0.15M PBS)稀釋到所需濃度。
  2、不連續密度梯度層的製備: 先將試管壁用牛血清濕潤,除去多餘血清,這種預處理可使逐層疊加的液平穩沿管壁流下,使形成滿意的界麵。在製備過程中一般用長針頭注射器從高密度向低密度逐層放置,有時相鄰兩層比重相差不大時,可將液放入注射器中,小針頭斜麵緊貼管壁,任其自然慢慢流下。
  3、裝樣:樣品體積和細胞濃度根據不同細胞而異,一般加樣體積不宜過大,細胞濃度也不可過高,否則會影響細胞的分離和回收。
  4、離心:一般采用離心力為400g,時間20~25min。由於多層之間密度差別不大,因此離心機加速、降速時要慢,要平穩。
  5、取樣:當所要分離的細胞絕大部分在兩層的界麵時,可逐層去除液後收集界麵部位的細胞;有時大部分細胞位於層中,則需要逐層收集。收獲含有液的細胞經2次洗滌後可供培養或檢測用。