NCI-H520人肺鱗癌細胞

Human Lung Squamous Cell Carcinoma ,H520

貨號：YJ-h238（STR鑒定）

價(jia) 格： 1800.0

規格： 1*10 ⁶              

細胞介紹

NCI-H520細胞是由Gazdar AF等在1982年建係而來，源於(yu) 鱗狀細胞肺癌組織；NCI-H520細胞p53 mRNA表達水平較正常肺組織低，但是沒有大的結構DNA的異常。NCI-H520細胞角蛋白、波形蛋白陽性，神經絲(si) 三聯蛋白陰性；NCI-H520細胞在軟瓊脂中可形成克隆。

細胞特性

1） 來源：人 肺癌組織

2） 形態：貼壁，上皮細胞樣，多角形，緊密排列

3） 含量：>1x10⁶  細胞數

4） 規格：T25瓶或者1mL凍存管包裝

5）用途：僅(jin) 供科研使用。

對於(yu) 貼壁細胞傳(chuan) 代可以參考以下方法：

1. 棄去培養(yang) 上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

2. 加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA於(yu) 培養(yang) 瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置於(yu) 37℃培養(yang) 箱中消化1-2分鍾（難消化的細胞可以適當延長消化時間），然後在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓並脫落，迅速拿回操作台，輕敲幾下培養(yang) 瓶後加入3-4ml含10%FBS的培養(yang) 基來終止消化。 

3. 輕輕打勻後吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補加1-2mL培養(yang) 液後吹勻。將細胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說明書(shu) 要求配置的新的完全培養(yang) 基以保持細胞的生長活力，後續傳(chuan) 代根據實際情況按1:2~1:5的比例進行。

3）細胞凍存: 收到細胞後建議在培養(yang) 前3代時凍存一批細胞種子以備後續實驗使用。

下麵T25瓶為(wei) 例；

1. 細胞凍存時按照細胞傳(chuan) 代的過程收集消化好的細胞到離心管中，可使用血球計數板計數，來決(jue) 定細胞的凍存密度。一般細胞的推薦凍存密度為(wei) 1×10⁶~1×10⁷個(ge) 活細胞/ml.

2. 1000rpm離心3-5min，去掉上清。用配製好的細胞凍存液重懸細胞 ，按每1ml凍存液含1×10⁶~1×10⁷個(ge) 活細胞/ml分配到一個(ge) 凍存管中將細胞分配到凍存管中，標注好名稱、代數、日期等信息。

3. 將要凍存的細胞置於(yu) 程序降溫盒中，-80度冰箱中過夜，之後轉入液氮容器中儲(chu) 存。同時記錄好凍存管在液氮容器中的位置以便後續查閱和使用。

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