牛偽(wei) 狂犬病抗原（PRV Ag）ELISA實驗原理

本試劑僅(jin) 供研究使用       目的：本試劑盒用於(yu) 測定牛血清，血漿及相關(guan) 液體(ti) 樣本中偽(wei) 狂犬病抗原（PRV Ag）水平。

實驗原理：

  本試劑盒采用雙抗體(ti) 夾心酶聯免疫法（ELISA）測定標本中牛偽(wei) 狂犬病抗原（PRV Ag）。用純化的抗原（PRV Ag）抗體(ti) 包被微孔板，製成固相抗體(ti) ，可與(yu) 樣品中偽(wei) 狂犬病抗原（PRV Ag）相結合，經洗滌除去未結合的抗體(ti) 和其他成分後再與(yu) HRP標記的偽(wei) 狂犬病抗原（PRV Ag）抗體(ti) 結合，形成抗體(ti) -抗原-酶標抗體(ti) 複合物，經過*洗滌後加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，並在酸的作用下轉化成zui終的黃色。用酶標儀(yi) 在450nm波長下測定吸光度（OD值），與(yu) CUTOFF值相比較，從(cong) 而判定標本中牛偽(wei) 狂犬病抗原（PRV Ag）的存在與(yu) 否。

試劑盒組成：

試劑盒組成	48孔配置	96孔配置	保存
說明書(shu)	1份	1份
封板膜	2片（48）	2片（96）
密封袋	1個(ge)	1個(ge)
酶標包被板	1×48	1×96	2-8℃保存
陰性對照	0.5ml×1瓶	0.5ml×1瓶	2-8℃保存
陽性對照	0.5ml×1瓶	0.5ml×1瓶	2-8℃保存
酶標試劑	3 ml×1瓶	6 ml×1瓶	2-8℃保存
樣品稀釋液	3 ml×1瓶	6 ml×1瓶	2-8℃保存
顯色劑A液	3 ml×1瓶	6 ml×1瓶	2-8℃保存
顯色劑B液	3 ml×1瓶	6 ml×1瓶	2-8℃保存
終止液	3ml×1瓶	6ml×1瓶	2-8℃保存
濃縮洗滌液	（20ml×20倍）×1瓶	（20ml×30倍）×1瓶	2-8℃保存

結果判定：

  試驗有效性：陽性對照孔平均值≥1.00; 陰性對照平均值≤0.10

  臨(lin) 界值（CUT OFF）計算：臨(lin) 界值=陰性對照孔平均值+0.15

  陰性判定：樣品OD值< 臨(lin) 界值（CUT OFF）者為(wei) 偽(wei) 狂犬病抗原（PRV Ag）陰性

  陽性判定：樣品OD值≥ 臨(lin) 界值（CUT OFF）者為(wei) 偽(wei) 狂犬病抗原（PRV Ag）陽性

注意事項

1．操作嚴(yan) 格按照說明書(shu) 進行，本試劑不同批號組分不得混用。

2．試劑盒從(cong) 冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鍾後方可使用，酶標包被板開封後如未用完，板條應裝入密封袋中保存。

3．濃洗滌液可能會(hui) 有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結果。

4．  封板膜隻限一次性使用，以避免交叉汙染。

5．底物請避光保存。

6．試驗結果判定必須以酶標儀(yi) 讀數為(wei) 準，使用雙波長檢測時，參考波長為(wei) 630nm

7．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳(chuan) 染物處理。終止液為(wei) 2M的硫酸，使用時必須注意安全。

保存條件及有效期

1．試劑盒保存：2-8℃。

2．有效期：6個(ge) 月