人胸苷酸合成酶（TS）ELISA試劑盒實驗原理

本試劑僅(jin) 供研究使用       目的：本試劑盒用於(yu) 測定人血清，血漿及相關(guan) 液體(ti) 樣本中胸苷酸合成酶（TS）的活性。

實驗原理：

  本試劑盒應用雙抗體(ti) 夾心法測定標本中人胸苷酸合成酶（TS）水平。用純化的人胸苷酸合成酶（TS）抗體(ti) 包被微孔板，製成固相抗體(ti) ，往包被單抗的微孔中依次加入胸苷酸合成酶（TS），再與(yu) HRP標記的胸苷酸合成酶（TS）抗體(ti) 結合，形成抗體(ti) -抗原-酶標抗體(ti) 複合物，經過*洗滌後加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，並在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的胸苷酸合成酶（TS）呈正相關(guan) 。用酶標儀(yi) 在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中人胸苷酸合成酶（TS）濃度。

試劑盒組成：

試劑盒組成	48孔配置	96孔配置	保存
說明書(shu)	1份	1份
封板膜	2片（48）	2片（96）
密封袋	1個(ge)	1個(ge)
酶標包被板	1×48	1×96	2-8℃保存
標準品：72U/L	0.5ml×1瓶	0.5ml×1瓶	2-8℃保存
標準品稀釋液	1.5ml×1瓶	1.5ml×1瓶	2-8℃保存
酶標試劑	3 ml×1瓶	6 ml×1瓶	2-8℃保存
樣品稀釋液	3 ml×1瓶	6 ml×1瓶	2-8℃保存
顯色劑A液	3 ml×1瓶	6 ml×1瓶	2-8℃保存
顯色劑B液	3 ml×1瓶	6 ml×1瓶	2-8℃保存
終止液	3ml×1瓶	6ml×1瓶	2-8℃保存
濃縮洗滌液	（20ml×20倍）×1瓶	（20ml×30倍）×1瓶	2-8℃保存

樣本處理及要求：

1. 血清：室溫血液自然凝固10-20分鍾，離心20分鍾左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如出現沉澱，應再次離心。

2. 血漿：應根據標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為(wei) 抗凝劑，混合10-20分鍾後，離心20分鍾左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉澱形成，應該再次離心。

3. 尿液：用無菌管收集，離心20分鍾左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉澱形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。

4. 細胞培養(yang) 上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鍾左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。檢測細胞內(nei) 的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬(wan) /ml左右。通過反複凍融，以使細胞破壞並放出細胞內(nei) 成份。離心20分鍾左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉澱形成，應再次離心。

5. 組織標本：切割標本後，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化後仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鍾左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。分裝後一份待檢測，其餘(yu) 冷凍備用。

6. 標本采集後盡早進行提取，提取按相關(guan) 文獻進行，提取後應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放於(yu) -20℃保存，但應避免反複凍融.

7. 不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑製辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

試劑盒性能：

1.樣品線性回歸與(yu) 預期濃度相關(guan) 係數R值為(wei) 0.92以上。

2.批內(nei) 與(yu) 批見應分別小於(yu) 9%和15%

保存條件及有效期：

1.試劑盒保存：2-8℃。

2．有效期：6個(ge) 月