LLC+luc小鼠肺癌細胞熒光素酶標記

,LLC/luc

貨號：YJ-0078a（LLC種屬鑒定）

價(jia) 格： 3200.0

規格： 1x10⁶

細胞描述

Lewis肺癌是一種從(cong) C57BL小鼠的肺中建立的細胞係，該細胞帶有原發性Lewis肺癌的植入所致的腫瘤，被廣泛用作轉移的模型，可用於(yu) 研究癌症化學治療劑的機製。

該細胞通過慢病毒轉染的方式攜帶Luc基因。

細胞特性

來源：小鼠肺癌組織

形態：半貼壁生長，混合形態，有上皮細胞樣，鬆散貼壁或懸浮有梭形、圓形等細胞形態 。

含量：含量：>1x10⁶  細胞數

規格：T25瓶或者1mL凍存管包裝

用途：僅(jin) 供科研使用。

細胞篩選

該細胞為(wei) 穩定轉染Luc的細胞，隨細胞傳(chuan) 代次數的增加，其Luc熒光強度會(hui) 逐漸減弱。若實驗要求需要維持熒光強度，可以加入嘌呤黴素進行再次篩選。        

建議收到細胞後至少傳(chuan) 3代，凍存留種後再進行篩選。

初次進行細胞篩選時，建議加入終濃度為(wei) 1ug/ml嘌呤黴素的完全培養(yang) 基維持培養(yang) ，若無細胞漂浮或者漂浮較少，即可更換為(wei) 含2ug/ml嘌呤黴素的完全培養(yang) 基繼續篩選，以此類推，至最高藥物濃度為(wei) 5ug/ml。若篩選過程中，漂浮細胞大於(yu) 60%，則停止篩選，換成正常培養(yang) 基培養(yang) ，至細胞密度約80%，可繼續加入同濃度嘌呤黴素進行篩選。當加入5ug/ml嘌呤黴素時細胞正常增殖，可停止篩選，用不含藥完全培養(yang) 基正常培養(yang) 。

一．培養(yang) 基及培養(yang) 凍存條件準備：

1) 準備：1640 基礎培養(yang) 基(推薦：YJ-0002)，優(you) 質胎牛血清10 %，P/S 1 %

2) 培養(yang) 條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yang) 箱濕度為(wei) 70%-80%。

3) 凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配。

二．細胞處理：

1） 凍存細胞的複蘇：

將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL完全培養(yang) 基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，完全培養(yang) 基重懸細胞。然後將細胞懸液加入含6-8ml完全培養(yang) 基的培養(yang) 瓶（或皿）中37℃培養(yang) 過夜。第二天顯微鏡下觀察細胞生長情況和細胞密度。

2） 細胞傳(chuan) 代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳(chuan) 代培養(yang) 。

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