大鼠外周血淋巴細胞分離液試劑盒

貨號：YJ-P8630

價(jia) 格： 1080.0

規格： 200ml

產(chan) 品介紹

本分離液為(wei) Ficoll、羥乙基澱粉550與(yu) 泛影酸葡甲胺的混合液。抗凝外周血可在分離液中分層。離心時，在Ficoll、羥乙基澱粉的作用下紅細胞與(yu) 粒細胞聚集並迅速沉降；此時，淋巴細胞及其他單個(ge) 核細胞仍處於(yu) 分離液上層，紅細胞汙染可忽略不計。大部分血小板可在細胞清洗低速離心過程中去除。 其他人及動物多種比重細胞分離液，因不同種屬不同比重分離液的細胞離散係數及細胞帶電不同，用戶在製定分離液時應提供所需分離液的比重、動物種屬及被分離細胞的名稱。

適用於(yu) 從(cong) 動物抗凝血液中分離淋巴細胞，無菌條件下所分離的淋巴細胞可用於(yu) 細胞培養(yang) 等。本品僅(jin) 供科研使用。

密度：1.0830±0.0001g/ml

本品易感染細菌，需無菌條件操作。無菌條件下操作，啟封後置常溫保存。如 4℃保存，本分離液易出現白色結晶，影響分離效果。

產(chan) 品內(nei) 容：

各種動物外周血淋巴細胞分離液 200mL

全血及組織稀釋液 200mL

細胞洗滌液 200mL

保存：18℃-25℃保存，有效期兩(liang) 年。本品易感染細菌，需無菌條件下操作。無菌條件下操作，啟封後常溫保存。如4℃保存，本分離液易出現白色結晶，影響分離效果。

操作步驟：

1. 取新鮮抗凝全血（EDTA、枸櫞酸鈉或肝素抗凝均可）或者去纖維蛋白血液，用等體(ti) 積的全血及組織稀釋液或者PBS稀釋全血。

2. 在離心管中加入適量分離液（當稀釋後血液體(ti) 積小於(yu) 3mL時，加入3mL分離液；大於(yu) 等於(yu) 3mL，加入等體(ti) 積分離液。但二者的總體(ti) 積不能超過離心管的三分之二，否則會(hui) 影響分離效果），將稀釋後的血液平鋪到分離液液麵上方，注意保持兩(liang) 液麵界麵清晰。（可以使用巴氏德吸管吸取血液，然後將血液小心的平鋪於(yu) 分離液上，因為(wei) 兩(liang) 者的密度差異，將形成明顯的分層界麵。如果樣品較多加樣時間較長，在離心之前出現紅細胞成團下沉屬正常現象。）

3. 室溫，水平轉子500~1000g，離心20~30min（血液的體(ti) 積越大所需的離心力越大，離心時間越長，最佳的分離條件需摸索，離心轉速最大不超過1200g）。

4. 離心後將出現明顯的分層：最上層是稀釋的血漿層，中間是透明的分離液層，血漿與(yu) 分離液之間的白膜層即為(wei) 淋巴細胞層，離心管底部是紅細胞與(yu) 粒細胞。

5. 小心的吸取白膜層細胞到15mL潔淨的離心管中， 10mL PBS或細胞洗滌液洗滌白膜層細胞。250g，離心10min。

6. 棄上清，5mL的PBS或細胞清洗液重懸細胞，250g，離心10min。

7. 重複步驟6

8. 棄上清，細胞重懸備用。

注意事項：

A. 開封前顛倒混勻，本分離液為(wei) 無菌產(chan) 品，為(wei) 延長分離液保存時間，請在無菌條件下啟封，避免微生物汙染。。

B. 分離液使用時應始終保持室溫（18℃~25℃），如室內(nei) 溫度較低，可將分離液預熱。4℃或者是溫度較低的條件下離心，可能會(hui) 導致白膜層中紅細胞汙染加重。 

C. 血液樣本最好為(wei) 新鮮抗凝血（采血2 h以內(nei) ），為(wei) 保持淋巴細胞的活性，應避免冷凍和冷藏。

D. 稀釋血液或洗滌細胞，不可使用含Ca、Mg離子的緩衝(chong) 液及培養(yang) 液，其成分會(hui) 導致血細胞凝集，大大降低細胞得率及純度。

E. 部分塑料製品（如聚苯乙烯）因其帶有的靜電作用，可能會(hui) 導致細胞掛壁，影響分離效果。

F. 血液樣本的粘稠度或者是溫度差異，可能會(hui) 影響分離效果，可以調節離心轉數和離心時間，摸索最佳的分離條件。

G. 吸取過多的淋巴細胞層及分離液層會(hui) 導致分離液交界處的粒細胞被吸出從(cong) 而使混雜的粒細胞數量增加；吸取過多的血漿層可能會(hui) 導致淋巴細胞中血漿蛋白及血小板汙染。

H. 如果要進一步對分離的細胞進行培養(yang) ，那在收集血液和分離過程中，注意無菌操作，避免微生物汙染。

I. 不同動物血液在不同比重分離液中的細胞離散係數及細胞帶電不同，用戶在製定分離液時應提供所需分離液的比重、動物種屬及被分離細胞的名稱。

注意事項

1. 本產(chan) 品僅(jin) 供科研使用。請勿用於(yu) 醫藥、臨(lin) 床診斷或治療，食品及化妝品等用途。請勿存放於(yu) 普通住宅區。

2. 為(wei) 了您的安全和健康，請穿好實驗服並佩戴一次性手套和口罩操作。

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