上海豐(feng) 翔生物科技有限公司是國內(nei) 免疫學產(chan) 品主要供應商之一，提供各種原裝、分裝檢測ELISA試劑盒,質優(you) 價(jia) 廉.我們(men) 均有具有豐(feng) 富服務經驗和深厚專(zhuan) 業(ye) 背景的人員團隊為(wei) 您提供技術服務和支持,有任何試劑盒方麵的問題都能幫您解決(jue) ,免除您的後顧之憂。並可以免費代檢測，讓您的實驗省時省力，更好的為(wei) 您服務。如有其他問題請及時。                                                                                                        
產(chan) 品名稱：

大鼠 S-100 B蛋白酶聯免疫分析（ELISA）試劑盒使用說明書(shu)

規格：原裝/96T 分裝 48T/96T

本試劑盒用於(yu) 測定大鼠血清，血漿及相關(guan) 液體(ti) 樣本中 S-100 B蛋白含量。

標本處理及要求 

1．血清、血漿標本可直接測定；

2．尿液、腦脊液、腹腔液：2000-3000轉/分離心10分鍾後，取上清液待測。

3．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑製辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

4．采集後盡早進行實驗，若不能馬上進行試驗，可將標本放於(yu) -20℃保存，但應避免反複凍融。

試劑盒組成

自備物品

1 、 37 ℃ 恒溫箱

2 、 標準規格酶標儀(yi)

3 、 精密移液器及一次性吸頭

4 、 蒸餾水

5 、 一次性試管

6 、 吸水紙

操作步驟

1. 標準品的稀釋與(yu) 加樣：在酶標包被板上設標準品孔 10 孔，在*、第二孔中分別加標

準品 100μl，然後在*、第二孔中加標準品稀釋液50μl，混勻；然後從(cong) *孔、第二

孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl，

混勻；然後在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉，再各取50μl分別加到第五、第六孔

中，再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul，混勻；混勻後從(cong) 第五、第六孔中各

取 50μl 分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液 50μl，混

勻後從(cong) 第七、第八孔中分別取 50μl 加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標準

品稀釋液50μl，混勻後從(cong) 第九第十孔中各取50μl棄掉。（稀釋後各孔加樣量都為(wei) 50μl，

濃度分別為(wei) 120ng/L，80ng/L ，40ng/L，20ng/L，10ng/L）。

2. 加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其餘(yu) 各步操作相同）、待測樣

品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然後再加待測樣品10μl（樣

品zui終稀釋度為(wei)  5 倍）。加樣將樣品加於(yu) 酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混

勻。

3. 溫育：用封板膜封板後置37℃溫育30 分鍾。     

4. 配液：將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋後備用

5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體(ti) ，甩幹，每孔加滿洗滌液，靜置 30 秒後棄去，如此

重複 5次，拍幹。

6. 加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。

7. 溫育：操作同 3。

8. 洗滌：操作同 5。

9. 顯色：每孔先加入顯色劑 A50μl，再加入顯色劑 B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色

15 分鍾.

10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。

11. 測定：以空白空調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應在加終止

液後 15分鍾以內(nei) 進行。

計算

    以標準物的濃度為(wei) 橫坐標，OD 值為(wei) 縱坐標，在坐標紙上繪出標準曲線，根據樣品的

OD值由標準曲線查出相應的濃度；再乘以稀釋倍數；或用標準物的濃度與(yu) OD值計算出標

準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數，

即為(wei) 樣品的實際濃度。

注意事項

1．試劑盒從(cong) 冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鍾後方可使用，酶標包被板開封後如未用完，板條應裝入密封袋中保存。

2．濃洗滌液可能會(hui) 有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結果。

3．各步加樣均應使用加樣器，並經常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間控製在5分鍾內(nei) ，如標本數量多，推薦使用排槍加樣。

4． 請每次測定的同時做標準曲線，做複孔。如標本中待測物質含量過高（樣本OD值大於(yu) 標準品孔*孔OD值的），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數（n倍）後再測定，計算時請zui後乘以總稀釋倍數（×n×5）。

5． 嚴(yan) 格按說明書(shu) 的操作進行，試驗結果判定必須以酶標儀(yi) 讀數為(wei) 準.

6．本試劑不同批號組分不得混用。

7．封板膜隻限一次性使用，以避免交叉汙染。

8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳(chuan) 染物處理。

9．底物請避光保存。

檢測範圍：

8ng/L -150ng/L   

保存條件及有效期

1．試劑盒保存：；2-8℃。

2．有效期：6個(ge) 月