規格：原裝/96T ELISA試劑盒 分裝 48T/96T ELISA試劑盒

實驗原理：

案例分析：人CD14分子（CDl4）ELISA

本試劑盒應用間接法測定標本中人CD14分子（CDl4）ELISA水平。用純化的人CD14分子（CDl4）ELISA抗體(ti) 包被微孔板，製成固相抗體(ti) ，往包被抗體(ti) 的微孔中依次加入已知濃度的CD14分子（CDl4）ELISA標準品和未知濃度的CD14分子（CDl4）ELISA待檢樣品，溫育後，加入生物素標記的抗IgG抗體(ti) ，再與(yu) 鏈黴親(qin) 和素-HRP結合，形成免疫複合物，經過*洗滌後加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，並在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的CD14分子（CDl4）ELISA呈正相關(guan) 。用酶標儀(yi) 在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中人CD14分子（CDl4）ELISA濃度。

樣本處理及要求：

1. 血清：室溫血液自然凝固10-20分鍾，離心20分鍾左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如出現沉澱，應再次離心。操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內(nei) 毒素的試管。

2. 血漿：應根據標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為(wei) 抗凝劑，混合10-20分鍾後，離心20分鍾左右（2000-3000轉/分）去除顆粒。仔細收集上清，保存過程中如有沉澱形成，應該再次離心。

3. 尿液：用無菌管收集，離心20分鍾左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉澱形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。

4. 細胞培養(yang) 上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鍾左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。檢測細胞內(nei) 的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬(wan) /ml左右。通過反複凍融，以使細胞破壞並放出細胞內(nei) 成份。離心20分鍾左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉澱形成，應再次離心。

5. 組織標本：切割標本後，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化後仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鍾左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。分裝後一份待檢測，其餘(yu) 冷凍備用。

6. 標本采集後盡早進行提取，提取按相關(guan) 文獻進行，提取後應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放於(yu) -20℃保存，但應避免反複凍融.

7. 不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑製辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

試劑盒組成：

1	20倍濃縮洗滌液	30ml×1瓶	7	終止液	6ml×1瓶
2	酶標試劑	6ml×1瓶	8	標準品（180 ng/L）	0.5ml×1瓶
3	酶標包被板	12孔×8條	9	標準品稀釋液	1.5ml×1瓶
4	樣品稀釋液	6ml×1瓶	10	說明書(shu)	1份
5	顯色劑A液	6ml×1瓶	11	封板膜	2張
6	顯色劑B液	6ml×1/瓶	12	密封袋	1個(ge)

注意事項：

1．試劑盒從(cong) 冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鍾後方可使用，酶標包被板開封後如未用完，板條應裝入密封袋中保存。

2．濃洗滌液可能會(hui) 有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結果。

3．各步加樣均應使用加樣器，並經常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間控製在5分鍾內(nei) ，如標本數量多，推薦使用排槍加樣。

4． 請每次測定的同時做標準曲線，做複孔。如標本中待測物質含量過高（樣本OD值大於(yu) 標準品孔*孔OD值的），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數（n倍）後再測定，計算時請zui後乘以總稀釋倍數（×n×5）。

5． 嚴(yan) 格按說明書(shu) 的操作進行，試驗結果判定必須以酶標儀(yi) 讀數為(wei) 準.

6．本試劑不同批號組分不得混用。

7．封板膜隻限一次性使用，以避免交叉汙染。

8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳(chuan) 染物處理。

9．底物請避光保存。

安全性：
1． 避免直接接觸終止液和底物。如不小心接觸到這些液體(ti) ，請盡快用水衝(chong) 洗。
2． 實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
3． 不要用嘴接觸試劑盒裏的任何成份。

4   Elisa試劑盒請遠離兒(er) 童

自備物品：

1 、 37 ℃ 恒溫箱

2 、 標準規格酶標儀(yi)

3 、 精密移液器及一次性吸頭

4 、 蒸餾水

5 、 一次性試管

6 、 吸水紙

保存條件及有效期：

1．試劑盒保存：；2-8℃。

2．有效期：6個(ge) 月

相關(guan) 產(chan) 品：

Human Macrophage-Derived Chemokine,MDC ELISA 

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Human L-Selectin ELISA 

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Human Interleukin 5,IL-5 ELISA 

Human Interleukin 4,IL-4 ELISA  

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Human Interleukin 2,IL-2 ELISA 

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Human Interleukin 1α,IL-1α ELISA 

Human soluble interleukin-1 receptor Ⅱ,IL-1sRⅡ ELISA 

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