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乙酰丁香酮的作用原理和配製方法
更新時間:2020-08-20 點擊次數:28250次
  乙酰丁香酮是一種酚類化學物,分子式是HOC6H2(OCH3)2COCH3。 類白色或淺褐色粉末或結晶,溶於CH2Cl2 ,參考濃度25mg/ml或2.5%。可誘導膿杆菌Vir基因的活化,從而促進外源基因的整合。作用機理是通過誘導農杆菌Vir區基因的活化與表達,促進T-DNA的加工與轉移,從而促使農杆菌T-DNA更容易進入植物基因組並與其整合。
  乙酰丁香酮作用原理:
  可誘導農杆菌Vir基因活化,從而促進外源基因的整合。所以好讓其有一定的誘導時間再轉化,效果要好些,而不是加完後直接轉化(需要活化)。
  As作為誘導性好的酚類化合物,其作用機理主要是通過誘導農杆菌Vir區基因的活化與表達,促進T-DNA的加工與轉移,從而使農杆菌T-DNA更易進入植物基因組並與其整合。農杆菌Ti或Ri質粒的Vir區編碼產物負責接收外界信號、T-DNA的加工、轉移及整合等功能,對菌種的侵染力起決定性的作用。農杆菌在生長培養基中培養繁殖時,所有的Vir區基因均處於非轉錄活性狀態,這些基因接受As等信號分子後便開始轉錄活化。
  乙酰丁香酮的配製方法:
  1,用於擬南芥花侵染的,配製使用的容積為DMSO,母液為100mM,使用濃度請參照相關文獻。
  2,另外一種是用於愈傷組織的侵染,是用少量甲醇溶解後,再用蒸餾水定容。之後過濾除菌。顯然兩者溶劑不一樣,不過建議還是使用DMSO。
  乙酰丁香酮使用方法:
  一般使用終濃度為100-200 umol/L。可用DMSO溶解,配置1M母液,分裝-20度保存。轉化前,將乙酰丁香酮加入轉化緩衝液,冰上放置約1 h後即可使用。
  貯存條件:密封室溫保存。