實驗技術簡介:
雙向電泳(two-dimensional electrophoresis)是等電聚焦電泳和SDS -PAGE的組合,即先進行等電聚焦電泳(按照pI分離),然後再進行SDS-PAGE (按照分子大小), 經染色得到的電泳圖是個(ge) 二維分布的蛋白質圖。
實驗原理:
雙向電泳是目前為(wei) 止zui有效、使用多的蛋白分離方法。差異蛋白質組學是在雙向電泳後用考麻斯亮藍、銀離子或熒光染料等將蛋白斑點染色,然後比較差異。本公司在各類微生物、培養(yang) 細胞、動植物組織(如動物軟硬組織、體(ti) 液、植物種子、葉子等)、亞(ya) 細胞組分的雙向電泳分離及後續質譜鑒定中均有豐(feng) 富的經驗。
蛋白質組學雙向電泳技術服務項目:
1.根據客戶需求定製蛋白質組學實驗方案
2.各種規格膠條長度的雙向電泳
3.考麻斯亮藍染色、銀離子染色; .
4.DIGE係統雙向電泳。
5.圖像分析
6.切膠質譜分析
服務說明:
1.我們(men) 的實驗隻對我們(men) 製作的樣本負責,如您提供的是直接做等點聚焦的樣本,我們(men) 不敢保證蛋白的有效分離。
2.蛋白質組學實驗的總體(ti) 實驗流程;
實驗流程:
1、樣本製備
2、固相預製膠條水化
3、第--向等電聚焦(IEF)
4、膠條平衡→第二向SDS-PAGE電泳
5、凝膠染色檢測
6、圖片掃描
雙向電泳服務結果提交:
1、實驗的試劑耗材、儀(yi) 器設備、操作過程--份;
2、實驗結果凝膠掃描圖片;
3、電泳凝膠(可收費幹膠) ;
4、剩餘(yu) 樣本。
說明:
1.樣品製備指可用通常程序處理的原樣,如樣品較特殊(需要去除核酸、鹽等雜質或需要濃縮),價(jia) 格將視進一步處理的難度和耗材用量另行商定;
2.建議客戶提供的原樣(組織、細胞、菌體(ti) 等)濕重不少於(yu) 100mg如直接提供蛋白提取物,則濃度不少於(yu) 4ug/ul,總量不少於(yu) 5mg;
3.樣品的還原和烷基化過程一般在製備時進行;
4.圖象處理與(yu) 切膠主要是手I操作成本。
客戶方需提供:
細胞,組織或蛋白。
實驗周期:
5-10天
可提供技術支持: .
1、從(cong) 現有的生物有機體(ti) 基因組中,經過酶切消化或PCR擴增等方法,獲得帶有目的基因的DNA片段。
2、在體(ti) 外,將帶有目的基因的外源DNA片段連接到具有選擇標記的載體(ti) 分子上,形成能夠自主複製的重組DNA分子。
3、將重組DNA分子轉移到適宜的受體(ti) 細胞,並使其一起增殖。
4、從(cong) 大量的細胞繁殖群體(ti) 中,篩選出獲得了重組DNA分子的受體(ti) 細胞克隆。
5、由篩選出來的受體(ti) 細胞克隆,提取出已經得到擴增的目的基因,供進一步分析研究使用。
6、將分離到的目的基因克隆到表達載體(ti) 上,導入受體(ti) 細胞,使之在新的遺傳(chuan) 背景下實現功能表達,產(chan) 生出人類所需要的物質。
從(cong) 2011年開始我們(men) 致力於(yu) 在生命科學領域、生物醫學實驗外包及論文潤色服務,協助客戶各類實驗服務及論文潤色十餘(yu) 年,是客戶您值得信賴的科研合作夥(huo) 伴!
如果您受時間、試驗條件等限製而無法完成您的課題研究,歡迎您與(yu) 我們(men) 聯係。
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