實驗意義(yi)

1.可應用於(yu) 闡明基因組結構與(yu) 功能以及基因之間相互作用的科學,對於(yu) 探索基因在生命活動中的作用及其機製具有重要意義(yi) 。

2.能夠為(wei) 一些疾病提供新的診斷方法和治療方法，可有助於(yu) 醫生獲得更多治療信息並進行個(ge) 性化精準醫療。

實驗原理及步驟

1. siRNA的設計和選擇:根據研究目的選擇合適的數據庫及軟件篩選靶序列的siRNA,通常需要設計多個(ge) siRNA,找到zui you zui有效的siRNA序列;

2. siRNA的製備:常用的體(ti) 外製備方法有化學合成、體(ti) 外轉錄、長片段dsRNA經RNase Il類降解，以及通過siRNA表達質粒載體(ti) 或者病毒載體(ti) 以及PCR製備的siRNA表達框架(siRNA expression cassettes, SECs)在細胞中表達製備siRNA;

3. siRNA的轉染: siRNA. siRNA表達載體(ti) 或者siRNA表達框架轉染進入細胞的方法主要有磷酸鈣共沉澱轉染、電穿孔轉染機械法(顯微注射和基因槍) . 陽離子脂質體(ti) 試劑轉染;

4.檢測靶基因的表達: WB等方法檢測靶基因的表達或者可以通過標記siRNA(如熒光標記)分析其表達，還可用作siRNA胞內(nei) 定位和雙標記實驗來追蹤轉染過程以及靶基因表達沉默過程。

實驗周期及交付標準

1.實驗周期: 2-4周

2.交付標準:質粒、片段驗證結果、實驗報告(實驗步驟.試劑、儀(yi) 器等)

需確認的信息

1.基因的種屬及ID號

2.基因序列

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