RNA幹擾RNAi基因幹擾SiRNA實驗服務
RNA幹擾(RNA interfering, RNAI) 現象是指由與(yu) 靶基因序列同源的雙鏈RNA(DsRNA)引|發的基因轉錄後的沉默過程,小於(yu) 擾RNA特異性介導相同序列的mRNA降解,阻斷相應基因表達。研謹生物提供的RAN幹擾技術包括化學合成小RNA片段(SiRNA) 和構建載體(ti) RNA (SnRNA)兩(liang) 種形式。實驗委托者隻需提供幹預基因名稱或基因序列ID,研謹生物免費設計合適的幹預位點,保證至少有一對小RNA有效抑製目的基因表達, 抑製效率不低於(yu) 70%。
RNA幹擾(SiRNA實驗)流程
第--步確定幹擾基因,設計並合成合適的小幹擾RNA (片段型或載體(ti) 型小幹擾RNA)。
第二步預轉染實驗,進行細胞培養(yang) ,摸索轉染條件、時間並進行必要的檢測(WB、PCR等) , 確定幹預效果zui佳的一對小RNA。
第三步正式實驗,設置合理實驗分組,進行瞬時或穩定轉染。
第四步轉染後檢測,根據實驗要求選擇細胞生物學檢測、蛋白檢測、分子生物學檢測等。以研究小幹擾RNA對於(yu) 細胞、蛋白或基因功能的影響。
RNA幹擾(SiRNA實驗)檢測(可根據委托者實驗需求選擇做)
1.細胞檢測:細胞增殖毒性MTT.細胞凋亡、細胞周期、細胞遷移、細胞侵襲;
2.蛋白檢測:免疫印跡WB、免疫細胞化學ICC、免疫熒光IF、流式細胞術FCM.酶聯免疫ELSIA;
3.分子生物檢測: RT-PCR. 實時熒光定量PCR、甲基化特異性PCR(MSP);
4.其他檢測:生化檢測、酶類檢測、脂類檢測、糖類檢測。
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