細胞實驗
服務項目 | 終端報價(jia) | 說明 | 實驗周期 |
普通細胞培養(yang) | 80元/天 | 普通培養(yang) ；轉染、藥物處理等另計 | 1周內(nei) |
CCK8檢測 | 1200元/板 | 包含所有試劑及耗材 | |
細胞凋亡檢測 | 單孔90元/例 | ||
細胞周期檢測 | 單孔90元/例 | ||
流式單標 | 單孔80元/例 | 本中心現有抗體(ti) 可免費共享，沒有的需客戶提供一抗 | |
流式雙標 | 100元/例 | ||
流式三標 | 150元/次 | ||
質粒轉染 | 500元/次 | ||
ROS活性氧檢測 | 120元/孔 | 包含所有試劑及耗材 | |
線粒體(ti) 膜電位檢測 | 120元/孔 | ||
平板克隆形成 | 200元/孔 | 1至2周內(nei) | |
軟瓊脂克隆形成 | 200元/孔 | ||
細胞劃痕 | 120元/孔 | 1周內(nei) | |
細胞粘附 | 150元/孔 | 包含所有試劑及耗材 | 1周內(nei) |
transwell轉移 | 180元/孔 | 包含所有試劑及耗材 | 1至2周內(nei) |
transwell侵襲 | 180元/孔 | 包含所有試劑及耗材 | 1至2周內(nei) |
常見問題FAQ
Q: CCK-8試劑盒檢測細胞增殖和毒性的優(you) 點有哪些?
A: A: CCK- 8較傳(chuan) 統的MTT法優(you) 點在於(yu)
1) MTT被線粒體(ti) 內(nei) 的一些脫氫還原酶還原成的formazan不是水溶性的，需要有特定的溶解液來溶解而CCK- 8產(chan) 生的formazan都是水溶性的,可以省去後續的溶解步驟，
2)CCK-8檢測靈敏度更高，更加穩定;
3)酚紅和血清對其測定無明顯影響;
4)不必去上清，不必洗,滌細胞更加簡便;
5)對細胞無明顯毒性，加入顯色後，可以在不同時間反複用酶標儀(yi) 讀板使檢測時間更加靈活，而且不影響細胞進行後續實驗。
Q :在做細胞的加藥實驗時，藥物對CCK-8測定是否有影響?如何解決(jue) ?
A: 1)注意如果藥物具有還原性(如維生素C)，會(hui) 和CCK-8發生顯色反應增加吸光度。
2)藥物中的金屬對CCK-8顯色有影響:當終濃度為(wei) 1mM的氯化亞(ya) 鉛、氧化鐵、硫酸銅會(hui) 抑製5%,15%, 90%的顯色反應使靈敏度降級。如果終濃度是10mM的話，將會(hui) 100%抑製。解決(jue) 辦法:首先要確認藥物是否有吸收,在含有藥物的培養(yang) 基中加入CCK-8,測定450nm的吸光度如果它的吸光度比不含藥物的培養(yang) 基(加CCK-8)的吸光度高，則證明藥物有影響，可在加CCK-8之前更換培養(yang) 基，去掉藥物的影響。
3) 由於(yu) 培養(yang) 基中可能含有氧化還原反應的物質，在正式實驗之前建議使用一一個(ge) 孔作-一 下檢測，有必要先確認培養(yang) 基和CCK-8是否反應。-般正常的0D值應該在0.4以下。
Q: CCK-8如何設定空白對照?
A :在不含細胞的培養(yang) 基中加入CCK-8.培養(yang) -定的時間，測定450nm的吸光度即為(wei) 空白對照。 在做加藥實驗(細胞毒性實驗)時，還應考慮藥物的吸收可在不含細胞.加入藥物的培養(yang) 基中加入CCK-8,培養(yang) -定的時間，測定450nm的吸光度作為(wei) 空白對照。
Q: CCK-8對於(yu) 不同的細胞，靈敏度是否-樣?
A:不一樣,懸浮細胞較貼壁細胞難染色。對於(yu) 貼壁細胞,一般加入CCK 8培養(yang) 1-4小時吸光度已經很高，但對於(yu) 懸浮細胞則可能吸光度較低，可以通過延長CCK-8的加入時間或增加細胞數量來解決(jue) 。
Q :可否采用CCK-8法進行腫瘤細胞的基質黏附實驗?
A :可以，以層粘連蛋白(Ln)包被96孔板通過計算不同時間點孔板中貼壁細胞的數量反映細胞的黏附性。細胞的黏附性越強，則單位時間內(nei) 貼於(yu) 鋪有L n板底的細胞數量越多去除尚末貼壁的細胞後,應用CCK-8等方法計量細胞數量便可間接反映不同細胞或不同處理的細胞黏附能力的差異。
Q :可否采用CCK-8法進行藥物的IC50檢測?
A :可以，將細胞培養(yang) 後按照不同濃度的藥物處理定時間後進行CCK-8檢測，根據吸光度繪製曲線，計算該藥物抑製細胞數量一半時的濃度(IC50)。
參考文獻
1. Ishiyama M, Miyazono Y, Sasamoto K, et al. A highly water-soluble disulfonated tetrazolium salt as a
chromogenicindicator for NADH as well as cell viability. Talanta 1997.44(7): 1299-1305.
2. Ishiyama M, Tominaga H, Shiga M, et al. A combined assay of cell viability and in vitro cytotoxicity
with a ，highlywater-soluble tetrazolium salt,
neutral red and
crystal violet.Biol Pharm Bull
1996, 19(11):1518-1520.
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