油紅O染色實驗服務
油紅0染色簡介:
油紅0脂肪染色法是指在日常病理診斷和科研工作中為(wei) 了顯示組織內(nei) 的脂肪常采用油紅0進行染色的方法,油紅0為(wei) 脂溶性染料,在脂肪內(nei) 能高度溶解,可特異性的使組織內(nei) 甘油三酯等中性脂肪著色。
油紅0染色實驗意義(yi) :
正常情況下,除脂肪細胞外其他細胞內(nei) -般不見或僅(jin) 見少量脂滴。在病理狀態下如這些細胞中出現脂滴或脂滴明顯增多,特別是在心、肝.腎等實質器官發生脂肪變性時,胞漿內(nei) 出現大小不一的空泡, 這時常需鑒別空泡性質,用脂肪染色來區分是脂肪變性還是水樣變性或糖原貯留。在動脈粥樣硬化時,內(nei) 皮細胞下的脂質沉著,用脂肪染色能將脂質清晰地顯示出來。由脂肪組織病變所弓|起的脂肪栓塞可用脂肪染色顯示栓子內(nei) 的脂質,從(cong) 而確診脂肪栓塞。用於(yu) 腫瘤組織的鑒別診斷,由脂肪組織所發生的腫瘤在與(yu) 其他組織來源的腫瘤相區分時,可以借助脂肪染色,脂肪組織所發生的腫瘤,脂肪染色為(wei) 陽性。並可根據所顯示的細胞形態特點與(yu) 類似腫瘤進行鑒別,腎透明細胞癌與(yu) 腎上腺瘤,卵巢纖維瘤與(yu) 卵泡膜細胞瘤。皮脂腺瘤與(yu) 鱗狀細胞癌的鑒別診斷有意義(yi) 。
實驗步驟:
1.固定:將冰凍切片複溫幹燥10min;細胞爬片4%多聚甲醛固定15min,PBS漂洗3次, 5min/次。
2.染色:入油紅0工作液孵育10-15min;細胞爬片破膜10-15min, PBS漂洗3次,5min次, 入油紅工作液37°C染色1-2h。
3.分化: 75%酒精分化2s,水洗1min。
4、複染細胞核: Harris蘇木素複染1-2min左右, 自來水洗,1%的鹽酸酒精分化數秒,自來水衝(chong) 洗,氨水返藍,流水衝(chong) 洗。
5、封片:用紙巾吸去周邊水分,甘油明膠封片。
實驗結果:
脂滴呈橘紅色至鮮紅色:細胞核呈深藍色。
實驗技巧:
1.油紅0是對脂類物質進行染色,石蠟切片在處理過程中脂類物質無法保存,所以石蠟切片不能進行油紅0染色。
2.油紅0染液使用一段時間後,染出的脂滴顏色會(hui) 偏黃,此時就需要更換染液。
3.油紅染色時,動作要輕,因為(wei) 脂滴易移位,並且在封片時應避免蓋玻片滑動。
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