神經元尼氏染色實驗服務

實驗技術簡介:

Franna Nissl (1860-1919) 1892年創立了Nissl染色法，以發現Nissl小體(ti) 和Niss變性而聞名。常用的堿性染料有CresyI violet (焦油紫，甲.酚紫，克紫) ; thionine (硫堇); tolridine blue (甲苯胺藍)等。尼氏體(ti) 為(wei) 嗜堿性物質，又稱嗜染質，光鏡下呈斑塊狀或細粒狀散在均勻分布。在一些大型的運動神經元,尼氏體(ti) 大而多，宛如虎皮花紋，又稱“虎斑"。電鏡下，尼氏體(ti) 由大量平行排列的粗麵內(nei) 質網和其間的遊離核糖體(ti) 組成。尼氏體(ti) 是神經元胞體(ti) 細胞質的特征性結構之一，神經元胞質另外一 特征性結構為(wei) 神經原纖維。

實驗技術原理:

正常的神經細胞都含有一定數量的尼氏體(ti) ， 它們(men) 主要分布於(yu) 神經細胞的漿中，形狀有大有小，如三角形，有的為(wei) 橢圓形。這些物質能被大部分的藍色染料所染色，這些染料如焦油堅牢紫(Cresyl fast violet)亞(ya) 甲藍(methylene blue)甲苯胺藍(toluidine blue)硫董(thionin) 等鈄其染為(wei) 藍色。但是，當神經細胞受傷(shang) 後，胞質內(nei) 的尼氏體(ti) 更可發生變化，嚴(yan) 重的可消失。

實驗操作流程:

1、切片脫蠟至水

2、用焦油堅牢紫水溶液浸染20-30分鍾

3、水洗

4、用95%酒精分化

5、*脫水，二甲苯透明，中性樹膠

實驗結果:

神經細胞單位:紫-藍色細胞核:紫藍色尼氏體(ti) :紫深藍色

實驗操作流程:

1、切片脫蠟至水

2、用焦油堅牢紫水溶液浸染20-30分鍾

3、水洗

4、用95%酒精分化

5、*脫水，二甲苯透明，中性樹膠

實驗注意事項:

客戶提供:

1、組織樣品:新鮮組織放入液氮或-80度保存,組織不少於(yu) 100mg;

2、培養(yang) 細胞:通過細胞計數取不少於(yu) 2x106個(ge) 細胞於(yu) EP管，加入0 .5ml生理鹽水或蛋白保護劑，混溝後保存於(yu) 冰箱(-80°C, 避免反複凍融) ;

3、血液細胞標本:以抗凝管保存血樣或以淋巴細胞分離液分離細胞後加入0.5m生理鹽水或蛋白保護劑,保存(-80°C可長期保存,避免反複凍融) ;

4、血清或細胞培養(yang) 液標本:離心去掉雜質後取上清入EP管，保存(49C可保存15-20天，-80°C可長期保存，避免反複凍融) ;

5、石蠟切片，冰凍切片以及細胞爬片，塗片等。

6、樣本運輸:可選擇以下任何-種方式寄送標本

組織樣本、細胞樣本以幹冰運輸或加入蛋白保護劑後，加冰袋寄送;

細胞樣本也可直接寄送培養(yang) 瓶(密封保證不汙染、培養(yang) 液不漏出) ;

血清或上清液直接加冰袋寄送(送視路程遠近2 -3天可到達)。

交付標準:

1、圖片;

2、完整項目報告(材料、試劑、儀(yi) 器、方法、數據分析、實驗結果)。

其他:

1、應用酒精分化切片，要迅速，防止過度分化，將切片上的顏色全部脫掉。

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