胞內(nei) DNA與(yu) 蛋白質相互作用: CHIP

實驗意義(yi) ：

染色體(ti) 免疫沉澱技術(Chromatin immunoprecipitation assay, CHIP)是研究體(ti) 內(nei) DNA與(yu) 蛋白質相互作用的技術，用於(yu) 闡明真核生物基因表達機製的基本途徑，CHIP可以檢測體(ti) 內(nei) 反式因子與(yu) DNA的動態作用，還可以研究組蛋白的各種共價(jia) 修飾

和基因表達之間的關(guan) 係，在基因表達調控研究中發揮著重要的作用。CHIP是表觀遺傳(chuan) 信息研究的主要方法，是深入分析惡性腫瘤、癌症、心血管疾病以及神經退行性疾病等病理診斷和基礎與(yu) 臨(lin) 床研究的有效工具。

實驗原理

染色體(ti) 免疫沉澱技術(Chromatin immunoprecipitation assay, CHIP)分析的是細胞內(nei) 生理狀態下DNA結合蛋白與(yu) 基因組DNA相互作用的技術，也稱作結合位點分析法，通常用於(yu) 轉錄因子結合位點或者組蛋白特異性修飾位點的研究。基本原理是

在活細胞的狀態固定DNA-蛋白質複合物，然後通過免疫學的方法沉澱複台物，特異性地富集純化後，對其進行檢測，從(cong) 而獲得蛋白質與(yu) DNA相互作用的信息。後續的分析檢測可以通過定量PCR. Western Blot. CHIP-Seq. CHIP-chip (微陣列芯芯分析)。

實驗流程

1.甲醇固定細胞:

2.超聲破碎; .

3.目的蛋白的抗體(ti) 孵育:

4.加入Protein A,結合抗體(ti) 靶蛋白-DNA複合物，沉澱:

5.洗脫後得到室集的靶蛋白-DNA複合物;

6.分離富集的DNA和蛋白質:

7.分析檢測。

結果展示

實驗完成周期及交付標準

實驗周期: 1-3個(ge) 月

交付標準: CHIP鑒定結果報告、 分析報告、實驗報告(試劑、耗材、實驗步驟)、原始數據等

實驗需與(yu) 客戶確認的信息

1.目的基因與(yu) 蛋白信息。

2、樣本類型與(yu) 種屬

3、是否提供抗體(ti)

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