蛋白質與(yu) RNA的互作: CLIP
染色質免疫沉澱分析(CLIP) 實驗意義(yi)
是染色質免疫沉澱技術(Chromatin ImmunoPrecipitation assay)的簡稱，屬於(yu) 兔疫沉澱技術的一種，用於(yu) 檢測蛋白質與(yu) DNA的相互作用。
實驗原理
其主要原理是基於(yu) RNA與(yu) 其相應的RNA結合蛋白會(hui) 在紫外照射下會(hui) 發生共價(jia) 結合,以RNA結合蛋白的特異性抗體(ti) 將RNA-蛋白複合物沉澱之後，回收其中的RNA片段，進行qRT-PCR檢測或測序分析。
實驗流程
1.根據研究目的決(jue) 定研究方案，檢測抗體(ti) 是否適用於(yu) Chip反應,設計檢測引物;
2.對生物樣品進行甲醛交聯;
3.超聲破碎基因組DNA
4.染色質免疫共沉澱;
5.qPCR檢測或(克隆)測序;1
實驗完成周期及交付標準
1.實驗周期: 1-3個(ge) 月 .
2.交付標準: CLIP鑒定結果報告、分析報告、實驗報告(試劑、 耗材、實驗步驟)、原始數據等
需確認的信息
1.目的基因與(yu) 蛋白信息。
2.樣本類型與(yu) 種屬
3.是否需要生信分析
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ELISA試劑盒免費代檢測 | CCK8檢測 | 基因組DNA提取
| 蛋白相互作用分析 |
Western Blot
| 免疫組化 | 熒光定量PCR | 動物模型服務 |
流式細胞檢測 | 細胞增殖 | 激光共聚焦 | DNA甲基化實驗 |
細胞劃痕 | 鈣離子濃度檢測 | 掃描電鏡實驗 | microRNA 測序 |
動物實驗 | Taqman探針 | ATP/ADP檢測
| 石蠟/冰凍切片 |
定點突變 | 線粒體(ti) 膜電位(MMP)檢測 | 細胞生長曲線的測定 | 藥理毒理動物實驗
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免疫共沉澱 | 真核表達載體(ti) 構建 | 染色質免疫沉澱CHIP | 非標定量（Label-free）實驗 |
