RNA綁定的DNA和蛋白相互作用: CHIRP
免疫共沉澱實驗(Chromatin Isolation by RNA Purification, CHIRP)是-種檢測體(ti) 內(nei) 與(yu) RNA綁定的DNA和蛋白相互作用的方法,可同時分析IncRNAcircRNA、蛋白及DNA三者互作關(guan) 係。
CHIRP實驗意義(yi)
IncRNA可與(yu) 蛋白質、DNA和RNA相互作用,實現多樣化功能,CHIRP可以探討IncRNA與(yu) 其互作的DNA.蛋白質的功能與(yu) 作用機製,是相關(guan) 科學研究工作的有力工具。IncRNA的研究在表觀遺傳(chuan) 調控等生命活動中發揮重要作用,CHIRP是研究
IncRNA的重要技術手段,可在全基因組範圍內(nei) 鑒定RNA與(yu) 染色質的互作,並對其進行定性、定量及定位的分析。
CHIRP實驗原理
CHIRP (Chromatin Isolation by RNA Purification)是通過結合生物素的核酸探針,將目標RNA拉下來,與(yu) 之共同作用的DNA染色體(ti) 片段(DNA與(yu) 蛋白質複合體(ti) )就會(hui) 被吸附下來,後可以通過qRT-PCR. WB.測序分析和質譜分析等檢測RNA. DNA和蛋白質。
CHIRP的實驗流程
①探針設計:設計反義(yi) 穿核苷酸探針:
②細胞培養(yang) ;
③破碎細胞:
④生物素標記的DNA探針與(yu) RNA雜交;
⑤CHIRP;
⑥RNA、DNA及核酸結合蛋白提取; .
⑦分析檢測。,
結果展示
實驗完成周期及交付標準
1.實驗周期: 1-3個(ge) 月
2.交付標準: CHIRP鑒定結果報告、分析報告、實驗報告(試劑、 耗材、實驗步驟)、原始數據等
實驗需與(yu) 客戶確認的信息
1.目的基因與(yu) 蛋白信息。
2.樣本類型與(yu) 種屬
3.是否需要生信分析
參考文獻
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[3]ZhuJJ,FuHJ , Wu Y G , et al. Function of IncRNAs and approaches to IncRNA-protein interactions[J]. Science
China Life Sciences, 2013, 56(10):876-885.
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